تعداد نشریات | 41 |
تعداد شمارهها | 1,129 |
تعداد مقالات | 13,888 |
تعداد مشاهده مقاله | 48,855,728 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 12,583,791 |
بیان هترولوگ ژن پروتئین پوششی ویروس موزائیک گلکلم در E. coli و تشکیل ذرات شبه ویروسی | ||
پژوهش های کاربردی در گیاهپزشکی | ||
مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 19 شهریور 1401 | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22034/arpp.2022.15200 | ||
نویسندگان | ||
مهین پوراسمعیل1؛ مقصود پژوهنده ![]() ![]() | ||
1گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
2گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
3گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
4نانوفناوری پزشکی. گروه نانوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم نوین پزشکی. مرکز تحقیقات علوم کاربردی دارویی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز. ایران | ||
چکیده | ||
چکیده ویروس موزائیک گلکلم (Cauliflower Mosaic Virus= CaMV)نخستین ویروس گیاهی شناسایی شده دارای ژنوم DNA است که خسارت اقتصادی زیادی به گیاهان خانواده Brassicaceae وارد میکند. تولید موفق کپسیدهای این ویروس هم در تشخیص سرولوژیکی آن و هم در تشکیل ذرات شبه ویروسی (Virus-Like Particles = VLPs) مفید است. در این تحقیق، DNA نمونه های گل کلم دارای علایم مشکوک به ویروس، استخراج و ژن پروتئین پوششی (Coat protein= CP) ویروس توسط آغازگرهای اختصاصی در PCR تکثیر شد. سپس توسط آنزیم های برشی BamHI و SmaI در وکتور بیانی pGEX2TKدر پایین دست GST وارد و بعد از تایید وکتور نوترکیب، توالی یابی انجام شد و توالی بدست آمده در پایگاه داده NCBI با برنامه BLASTn با توالی های موجود در بانک ژن مقایسه شد و مشخص گردید که این توالی مربوط به ویروس CaMV با شماره دسترسی KF357590.1 در پایگاه NCBI است. بیان پروتئین CP در باکتری E. coli سویه Rosetta القاء و بهینه سازی شد. بیان بسیار بالای این پروتئین در دمای 37 درجه سانتیگراد و 6 ساعت پس از القا به کمک IPTG با غلظت نهایی 1mM بدست آمد. سپس این پروتئین با نانوذرات سفاروز که توانایی اتصال به GST را دارند خالص سازی و در SDS-PAGE مشاهده شد. پروتئین های خالص شده CP با میکروسکوپ الکترونی بررسی شد و ذرات شبه ویروسی (VLPs) مشاهده گردید. تصاویر مربوط به میکروسکوپ الکترونی تولید VLPs این ویروس را بدون ایجاد اینکلوژن بادی و با مونتاژ صحیح تائید می کند که می تواند در حمل دارو در پزشکی مورد آزمایش قرار گیرد. | ||
کلیدواژهها | ||
کلمات کلیدی: بیان پروتئین؛ ژن پوشش پروتئینی؛ ذرات شبه ویروس؛ ویروس موزائیک گل کلم؛ همسانه سازی | ||
مراجع | ||
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 329 |